Skip to content

Badanie dostarczania krwi do RNA wirusa zachodniego Nilu metodą testowania amplifikacji kwasów nukleinowych ad

3 miesiące ago

578 words

Nasze wyniki pozwalają oszacować liczbę infekcji odwróconych w 2003 r. Dzięki wdrożeniu badań przesiewowych z zastosowaniem minipoolowych testów amplifikacji kwasów nukleinowych oraz oszacować dodatkową korzyść z badania przesiewowego indywidualnych darowizn w regionach z sezonową epidemią zakażeń wirusem zachodniego Nilu. Podsumowujemy także doświadczenia związane z wdrożeniem ukierunkowanej strategii badań przesiewowych polegającej na testowaniu amplifikacji kwasów nukleinowych w ramach indywidualnych darowizn w 2004 r., Strategii, która z powodzeniem zidentyfikowała jednostki o niskim poziomie wiremii, które zostałyby pominięte w testach minipool. Metody
Laboratoria Blood Systems monitorują oddawanie krwi w dwóch licencjonowanych przez FDA laboratoriach w Tempe w Arizonie i Bedford w Teksasie. Do klientów należy 18 punktów poboru krwi należących do Blood Systems (Scottsdale, Ariz.) I 59 innych programów zbierania krwi opartych na społecznościach i szpitalach. Obszary geograficzne objęte tą bazą klientów obejmują znaczną część południowo-zachodniego, południowego, centralnych równin i części Kalifornii. Roczna objętość testowa wynosi około 2,2 miliona datków, co stanowi około 20 procent amerykańskiego zaopatrzenia w krew.
Do badań amplifikacji kwasów nukleinowych użyto systemu amplifikacji za pośrednictwem transkrybowanego wirusa West Nile (Procleix WNV Assay, Gen-Probe i Chiron). Technika ta polega na lizie cząsteczek wirusowych w osoczu, pochodzących z pojedynczych dawek lub z minipola próbek osocza z 16 dawek i izolacji RNA wirusa zachodniego Nilu za pomocą sond związanych z kulkami magnetycznymi, amplifikacji z użyciem transkrypcji RNA, a następnie wykrywanie przez sondę chemiluminescencyjną. 9. Wszystkie próbki w reaktywnym minipoolu są następnie testowane indywidualnie. Test ma analityczną czułość w przybliżeniu 4 kopii RNA na mililitr, gdy jest stosowany dla indywidualnych dawek (50% granica wykrywalności przez analizę probitową rozcieńczeń standardów zachodniego Nilu) i czułość około 45 kopii na mililitr przy stosowaniu do testowania minipool. 10
Poszczególne próbki zidentyfikowane jako reaktywne zostały ocenione za pomocą algorytmu potwierdzającego z użyciem wielu testów dla wirusa Zachodniego Nilu. 10-12 Testy te obejmowały alternatywny test amplifikacji kwasu nukleinowego (modyfikacja polimerazy TaqMan [PCR] ] test lub inny oparty na transkrypcji test amplifikacyjny z udziałem transkrypcji, przeprowadzony przez Bayer Reference Laboratory) i testy osocza dla wirusowego przeciwciała IgM i IgG (Focus Diagnostics) .10,13 Wszyscy dawcy z testami reaktywnymi zostali niezwłocznie poproszeni o zapisanie się do badanie, obejmujące wizyty powtórkowe mniej więcej co tydzień. Kolejne próbki badano na obecność RNA wirusa zachodniego Nilu oraz przeciwciał IgM i IgG przeciwko wirusowi zachodniego Nilu. Potwierdzony wynik dodatni został określony przez wykrycie wirusowej IgM w próbce indeksu lub w próbce kontrolnej, wykrycie wirusowego RNA w próbce indeksu za pomocą alternatywnego testu amplifikacji kwasu nukleinowego lub wykrycie wirusowego RNA w surowicy. kolejna próbka za pomocą testu amplifikacji z udziałem transkrypcji.11 Ponieważ rzeczywisty czas, w którym dawcy zwrócili się do obserwacji, był różny (powodujący nieregularne pobieranie krwi) i ponieważ serokonwersja wystąpiłaby w przedziale między ostatnim seronegatywnym a pierwszy wynik seropozytywny, mediana czasu (i zakresów międzykwartylowych) do serokonwersji IgM i IgG został oszacowany za pomocą analizy, w której dane były cenzurowane w odstępach między wizytami.14 Obciążenie wirusem w potwierdzonych pozytywnych donacjach indeksu, dla których zamrożone składniki plazmy były dostępne do analizy oceniano za pomocą kinetycznego testu PCR opartego na technikach TaqMan wychwytywania celu (Chiron) .10
Laboratoria badań krwi przeprowadziły także geograficznie i czasowo badania amplifikacji kwasów nukleinowych poszczególnych donacji w 2003 r. Zgodnie z dwoma protokołami
[podobne: nietolerancja kazeiny, poradnia psychologiczna rzeszów, calcio forte ]
[przypisy: britport, ketrel lek, osteon świdnica ]

0 thoughts on “Badanie dostarczania krwi do RNA wirusa zachodniego Nilu metodą testowania amplifikacji kwasów nukleinowych ad”